化妆水作为直接接触皮肤的化妆品，其微生物污染状况直接关系到使用者的皮肤健康。

需氧菌总数是衡量化妆水卫生质量的重要指标之一，通过需氧菌总数实验，可判断化妆水在生产、储存、运输等环节是否受到微生物污染，以及污染程度是否符合相关标准要求，从而保障产品的安全性和稳定性。

该实验的原理是利用需氧菌在适宜的营养条件、温度和时间下能够生长繁殖的特性，将化妆水样品经过适当稀释后，接种到营养琼脂培养基上，在 36℃±1℃的培养箱中培养 48 小时 ±2 小时，计数培养基上生长的菌落总数，以此来确定每克或每毫升样品中的需氧菌数量。

营养琼脂培养基为需氧菌提供了丰富的碳源、氮源、维生素和矿物质等营养物质，能满足大多数需氧菌的生长需求，而适宜的培养温度和时间则为细菌的增殖提供了良好环境，确保能够充分培养出样品中的需氧菌。

实验的关键步骤包括样品稀释、接种、培养和计数。

样品稀释环节，由于化妆水可能含有较高浓度的防腐剂，会抑制细菌生长，因此需要先进行中和处理，常用的中和剂有卵磷脂、吐温 - 80 等，以消除防腐剂的抑菌作用。

然后，取一定量的化妆水样品，用无菌生理盐水按照 10 倍递增的方式进行稀释，选择 2 - 3 个适宜的稀释度进行接种，一般来说，选择菌落数在 30 - 300 之间的稀释度作为计数依据，以保证结果的准确性和可靠性。

接种时，采用倾注法，将一定体积的稀释液加入无菌平皿中，再倒入融化并冷却至 45℃ - 50℃的营养琼脂培养基，迅速混匀，待培养基凝固后，将平皿倒置放入培养箱中培养。培养过程中要确保培养箱温度稳定，避免温度波动影响细菌生长。

培养结束后，对每个平皿中的菌落进行计数，计数时需注意区分不同形态的菌落，避免漏计或误计。

若平皿中菌落数过多无法准确计数，可记录为 “多不可计”，并选择更低的稀释度进行计数。

培养结束后，对每个平皿中的菌落进行计数，计数时需注意区分不同形态的菌落，避免漏计或误计。

若平皿中菌落数过多无法准确计数，可记录为 “多不可计”，并选择更低的稀释度进行计数。

结果判断需根据计数结果计算样品中的需氧菌总数，计算公式为：需氧菌总数（CFU/g 或 CFU/mL）= 平均菌落数 × 稀释倍数 × 接种体积的倒数。

同时，要将结果与相关标准进行比对，例如《化妆品安全技术规范》中规定，眼部化妆品、口唇化妆品和儿童化妆品的需氧菌总数不得超过 500 CFU/g 或 500 CFU/mL，其他化妆品不得超过 1000 CFU/g 或 1000 CFU/mL。

若样品的需氧菌总数超过标准限值，则判定该化妆水卫生质量不合格，可能存在导致皮肤感染、炎症等风险，需要进行返工处理或禁止销售。

在实验过程中，无菌操作是保证结果准确性的关键。实验所用的培养皿、移液管、培养基等都需要经过灭菌处理，实验人员需穿戴无菌工作服、口罩、手套等，在无菌操作台上进行操作，避免环境中的微生物污染样品。

此外，空白对照实验也必不可少，即取等量的无菌生理盐水或稀释液按照相同的步骤进行培养，若空白对照出现菌落，则说明实验过程中存在污染，需重新进行实验。

通过化妆水需氧菌总数实验，能够有效监控产品的微生物污染状况，为化妆品企业的质量控制提供数据支持，同时也为监管部门的监督检查提供依据，从而保障消费者的使用安全。

对于不合格的产品，企业应及时查找污染原因，如原材料污染、生产环境不洁、包装密封不严等，并采取相应的改进措施，确保产品符合卫生标准。